雙光束紫外可見分光光度計(jì)是一種廣泛應(yīng)用于化學(xué)、生物、環(huán)境等領(lǐng)域的精密儀器。
一、原理
雙光束紫外可見分光光度計(jì)基于比較樣品溶液與參比溶液對(duì)不同波長(zhǎng)的光的吸收和透射程度的差異，從而進(jìn)行定量分析。其基本原理如下：
1.光源發(fā)射：通常采用氘燈作為紫外光源和鎢燈作為可見光源。氘燈主要用于紫外區(qū)域，鎢燈主要用于可見區(qū)域。
2.分束系統(tǒng)：光源發(fā)射的光線通過準(zhǔn)直系統(tǒng)進(jìn)入分束器，分束器將光線分為兩束，一束作為參比光束，另一束作為樣品光束。
3.樣品測(cè)量：參比光束和樣品光束分別通過樣品池，樣品池中放置著待測(cè)樣品溶液。根據(jù)樣品溶液的吸收特性，將吸收光信號(hào)轉(zhuǎn)化為電信號(hào)。
4.檢測(cè)系統(tǒng)：光電二極管將參比光束和樣品光束的光信號(hào)轉(zhuǎn)化為電信號(hào)，并通過放大器進(jìn)行放大。
5.數(shù)據(jù)處理：通過將參比光信號(hào)和樣品光信號(hào)作差，并經(jīng)過一系列計(jì)算和校正，得到最終的吸光度值。
二、結(jié)構(gòu)
通常由以下幾個(gè)主要部分組成：
1.光源：包括氘燈和鎢燈，分別負(fù)責(zé)紫外和可見光區(qū)域的光源發(fā)射。
2.分束器：將光源發(fā)射的光線分為參比光束和樣品光束。
3.樣品池：用于放置待測(cè)樣品溶液的容器，通常是石英或玻璃制成。
4.光電傳感器：用于將光信號(hào)轉(zhuǎn)化為電信號(hào)，常用的光電傳感器有光電二極管。
5.放大器：對(duì)光電傳感器輸出的電信號(hào)進(jìn)行放大。
6.數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)：對(duì)放大后的信號(hào)進(jìn)行計(jì)算、校正和顯示，得到最終的吸光度值。
三、工作方式
雙光束紫外可見分光光度計(jì)的工作方式主要包括以下幾個(gè)步驟：
1.校零：將樣品池中的溶劑作為參比光束和樣品光束的參考，進(jìn)行校零操作，消除光源和光學(xué)系統(tǒng)的背景。
2.加載樣品：將待測(cè)溶液放置到樣品池中，確保樣品在透射光線路徑中。
3.掃描光譜：通過改變分光光度計(jì)的波長(zhǎng)或重置濾光片，對(duì)一段波長(zhǎng)范圍內(nèi)的吸光度進(jìn)行掃描。
4.記錄數(shù)據(jù)：將吸光度數(shù)據(jù)記錄下來，并可通過連接計(jì)算機(jī)進(jìn)行數(shù)據(jù)存儲(chǔ)和進(jìn)一步分析。
四、應(yīng)用
廣泛應(yīng)用于化學(xué)、生物、環(huán)境等領(lǐng)域的定量分析和質(zhì)量控制。它的應(yīng)用包括但不限于以下幾個(gè)方面：
1.藥物分析：用于藥物含量的測(cè)定、質(zhì)量評(píng)價(jià)和藥代動(dòng)力學(xué)研究。
2.生物分析：用于蛋白質(zhì)、核酸和酶等生物大分子的定量分析。
3.環(huán)境監(jiān)測(cè)：用于水體、大氣和土壤中污染物的測(cè)定和追蹤。
4.食品安全：用于食品中添加劑、殘留物和營(yíng)養(yǎng)成分的定量分析。
5.化學(xué)研究：用于化合物濃度測(cè)定、反應(yīng)動(dòng)力學(xué)和光譜特性研究。
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