由于不同的物質(zhì)對不同波長光有不同的吸收度,其吸收曲線形狀和大吸收波長λmax不同;但同一種物質(zhì)即使?jié)舛炔煌?,其吸收曲線形狀仍相λmax不變。因此,根據(jù)光譜圖上吸收光譜的形狀等特征就可以進行定性分析,吸收曲線是物質(zhì)定性的基礎(chǔ)。
儀器設(shè)備簡單。相對其它光譜儀器,1200可見分光光度計具有結(jié)構(gòu)簡單,儀器制造和運行成本較低等優(yōu)點。應用廣泛。紫外可見分光光度計既可用于無機金屬離子又可用于有機化合物的分析;既可用于有機化合物的定性定量分析,又可用于幫助有機化合物結(jié)構(gòu)解析;在化學研究中,還可用于如平衡常數(shù)的測定等。由于紫外可見吸收光譜特征性不強,提供的結(jié)構(gòu)信息不如紅外吸收光譜等豐富,且受介質(zhì)影響較大,故單獨用紫外可見分光光度計對未知化合物定性比較困難,定量分析也容易存在光譜干擾或其它干擾。隨著人們對分析儀器靈敏度的要求日益增高,紫外可見分光夕光度計也越來越難以滿足要求, 已逐漸被其它分析儀器所代替,但由于紫外可見分光光度計操作費用較低,某些顯色反應有靈敏度高、選擇性好等優(yōu)點,使其仍發(fā)揮著重要的作用。
但由于溶劑對電子光譜有較大的影響,且影響較為復雜。改變?nèi)軇┑臉O性,會引起吸收帶形狀的變化。例如,當溶劑的極性由非極性改囊到極性時,大多數(shù)化合物的紫外可見吸收光譜精細結(jié)構(gòu)消失,吸收帶變得更為平滑。改變?nèi)軇┑臉O性,還會使吸收帶的大吸收波長λmax發(fā)生變化。因此,1200可見分光光度計在采用紫外可見吸收光譜進行定性分析時,應注意考慮溶劑等條件。此外,由于相當數(shù)量化合物的紫外可見吸收光本身的特征性了見分光光度計一般不單獨用于對未知化合物定性,而作為一種輔助的定性手段。
(1)實驗室環(huán)境定期清潔
?。?)光源的保養(yǎng)
燈的位置如果有不合適的安裝,會導致儀器性能下降、噪聲加、雜散光增加。當使用微量池時,燈和樣品架的位置需要更的校準。
光源燈不小心沾附油污后,應關(guān)閉光源燈,用無水乙醇擦拭。不要用手去觸摸氘燈及鎢燈,粉塵可用洗耳球吹去。燈的老化會造成能量的不足,引起儀器性能下降、噪聲增加、雜散光增加。光源燈不穩(wěn)定或超過使用壽命,應更換新燈。當儀器停止工作時,必須切斷電源,選擇開關(guān)放在“關(guān)”,儀器在不使用時不要打開光源燈。
?。?)輸入電源
為了加強儀器的抗干擾性能,建議使用200W以上電子交流穩(wěn)器或交流恒壓穩(wěn)壓源,保證工作時候電壓的穩(wěn)定。使用前應對儀器的安全性進行險查,電源電壓是否正常、接地線是否牢固可靠,在得到確認后方可接通電源使用。太大的輸入電源(220V交流,波動會導致儀器的不穩(wěn)定和性能的下降。這種源波動通常是由功率不足、AC電源線老化或電源線上接有大功率的負載造成。當儀器停止工作時,應切斷電源、關(guān)掉開關(guān)。
(4)1200可見分光光度計的其它保養(yǎng)
?、賰x器使用結(jié)束后,應及時擦干凈樣品室內(nèi)的殘留液。如有溶液灑進樣品室,必須及時清理干凈,保持樣品室干燥、無污染。
?、谖粘丶芾瓧U要按規(guī)定的方向平穩(wěn)地拉動,不可用力過猛、過快,遇到滑拉動不暢,可在滑桿上均勻涂抹適量凡士林。
?、蹆x器使用一定周期后,對光學盒的密封窗口進行清潔,必要時對光路進行校準,對機械部分進行清潔和必要的潤滑等。
④不要在1200可見分光光度計上方傾倒測試樣品,以免樣品污染儀器表面,損壞儀器。當儀器外殼、樣品室蓋和操作鍵盤沾污時,用干軟布或紙巾擦拭。